NGS प्रतिक्रियाओं के लिए टेम्प्लेट तैयार करने में दो विधियों का उपयोग किया जाता है : एकल DNA अणुओं, और एकल DNA अणु टेम्पलेट्स से उत्पन्न होने वाले प्रवर्धित टेम्पलेट। जो इमेजिंग सिस्टम एकल प्रतिदीप्ति घटनाओं का सामना नहीं कर सकते हैं, DNA टेम्पलेट्स का प्रवर्धन आवश्यक है। तीन सबसे आम प्रवर्धन विधियां पायस PCR (emPCR), रोलिंग सर्कल और ठोस-चरण प्रवर्धन हैं। टेम्पलेट्स का अंतिम वितरण स्थानिक रूप से यादृच्छिक या ग्रिड पर हो सकता है।
इमल्शन पीसीआर
पायस PCR विधियों में, एक DNA पुस्तकालय पहली बार जीनोमिक DNA के यादृच्छिक विखंडन के माध्यम से उत्पन्न होता है । एकल-फंसे DNA टुकड़े (टेम्प्लेट) एडेप्टर या लिंकर्स के साथ मोतियों की सतह से जुड़े होते हैं, और एक मनका DNA लाइब्रेरी से एकल DNA टुकड़े से जुड़ा होता है । मोतियों की सतह में अनुक्रमों के साथ ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड जांच होती है जो DNA टुकड़ों को बांधने वाले एडेप्टर के पूरक हैं । मोतियों को फिर पानी-तेल इमल्शन की बूंदों में मिलाया जाता है। जलीय जल-तेल पायस में, एक मनके को कैप्चर करने वाली प्रत्येक बूंद एक PCR होती है। DNA DNA PCR microreactor जो एकल DNA टेम्पलेट की प्रवर्धित प्रतियाँ तैयार करता है ।
छवि 155A | पैबियो एसएमआरटी प्रौद्योगिकी और ऑक्सफोर्ड नैनोपोर मिथाइलेशन का सामना करने के लिए अनलेडेड DNA का उपयोग कर सकते हैं । | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) विकिमीडिया कॉमन्स से
लेखक : Yavor Mendel
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